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Trizol法
1、將組織在液氮中磨成粉末后,再以50-100mg組織加入1ml的Trizol液研磨；每2E6個(gè)細(xì)胞加入1mLTrizol.注意樣品總體積不能超過(guò)所用Trizol體積的10%.
2、研磨液室溫放置5min,然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,蓋緊離心管,用手劇烈搖蕩離心管15秒,靜置5min,12,000rpm離心5min.
3、取上層水相于一新的離心管,按每1ml Trizol液加0.5ml異丙醇的比例加入異丙醇,劇烈振搖使混勻,4℃,12,000rpm離心10min.
4、棄去上清液,按每1ml Trizol液加入至少1ml的比例加入70%乙醇,渦旋混勻 ,4℃×7,500rpm×5min.
5、重復(fù)以上步驟.
6、小心棄去上清液,然后室溫或真空干燥5-10min,加入30μL RNase Free的水中.
7、電泳檢測(cè).