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IPTG 為安慰性誘導(dǎo)物，X-gal 為生色底物，二者共同用于藍白斑篩選。IPTG 可誘導(dǎo)載體Lac操縱子DNA 區(qū)段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段，該片段可與宿主細胞編碼的缺陷型β-半乳糖苷酶實現(xiàn)基因內(nèi)互補(α 互補)。實現(xiàn)α 互補的細菌鋪在含有X-gal 生色底物的培養(yǎng)基上，可形成藍色菌落。外源DNA 插入質(zhì)粒的多克隆位點后可破壞α 互補作用，將產(chǎn)生白色菌落。

儲液濃度：2％（w/v）的X-gal溶于二甲基甲酰胺中。避光儲存于-20℃。

產(chǎn)品優(yōu)點：

 
1.純度高Assay (HPLC): 99.4 %

 
2.靈敏度高，在藍白斑篩選實驗中，能夠使得菌落清晰地顯示藍斑或者白斑，顏色對比明顯，能夠清晰辨別出目的菌落。

3.穩(wěn)定性強，即使經(jīng)過121℃滅菌20min處理，也不會影響其活性。

•藍白斑菌落篩選，以區(qū)分重組（白色）與非重組（藍色）菌落
•轉(zhuǎn)染真核細胞中 β-半乳糖苷酶報告基因表達的可視化
•免疫學(xué)和組織化學(xué)程序中 β-半乳糖苷酶活性的檢測

 

注意:

•建議針對 X-Gal 制備 20 mg/mL 儲備液（溶于二甲基甲酰胺 (DMF) 或二甲亞砜 (DMSO)）。

 DMF 可溶解一些塑料材料。因此需避免直接將含有二甲基甲酰胺的溶液加入到塑料培養(yǎng)皿中。

•DMF 有毒。在瓊脂平板上涂布細菌前，使含有二甲基甲酰胺的 X-Gal 溶液完全干燥。